miR-34c-3p与M2型肿瘤相关巨噬细胞在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的:检测miR-34c-3p与M2型肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophage,TAM)在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中的表达，并探讨其在乳腺癌发病中的意义。方法:选择2017年2月至2018年1月于西京医院就诊的68例TNBC患者作为实验组(A组)，以同期就诊的70例乳腺纤维腺瘤患者作为对照组(B组)。采用Real-time RT-PCR 检测组织标本中miR-34c-3p的表达；流式细胞检测M2型TAM的表达；ELISA法检测血清中IL-10的表达。并进一步分析miR-34c-3p的表达与乳腺癌M2型TAM及血清IL-10水平的相关性。结果:A、B组miR-34c-3p的相对表达量分别为0.84±0.08、1.29±0.71，A组明显低于B组，差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较，A组M2型TAM(CD68+CD163+)细胞比例显著升高(P<0.05)。A组血清IL-10的表达［(19.69±4.93) pg/ml］较B组［(17.26±3.51) pg/ml］显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。TNBC组织中miR-34c-3p的表达与M2型TAM比例及血清IL-10表达均呈显著负相关(r=-0.508，r=-0.656，P<0.05)。结论:TNBC组织中miR-34c-3p的表达下调，M2型TAM比例及血清IL-10表达均显著升高，促进TNBC进展。     

可手术非小细胞肺癌患者术前血浆中VEGF/sVEGFR-1比值与长期生存关系的初步探索

目的:检测可手术非小细胞肺癌患者术前血浆中VEGF、sVEGFR-1的表达水平，并分析其与临床病理资料和长期生存的关系。方法:收集98例可手术非小细胞肺癌患者术前静脉血，用ELISA方法检测血浆中VEGF和sVEGFR-1的表达水平，并分析其表达水平与患者临床病理资料和长期生存之间的关系。结果:可手术非小细胞肺癌患者术前血浆中VEGF、sVEGFR-1的表达水平与患者的临床病理资料没有相关性，但是多因素生存分析中，年龄、TNM分期和VEGF/sVEGFR-1比值是可手术非小细胞肺癌患者长期生存的独立预后因子。结论:血浆VEGF/sVEGFR-1比值与可手术非小细胞肺癌患者的长期生存相关，该比值在非小细胞肺癌的意义值得进一步深入研究。     

补骨脂酚通过MAPK途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的:研究补骨脂酚对人肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:应用噻唑蓝法（MTT法）和倒置显微镜技术考察补骨脂酚对HepG2细胞生长的影响；采用荧光显微镜观察补骨脂酚处理后细胞凋亡；利用蛋白免疫印迹法检测补骨脂酚对HepG2细胞中凋亡相关蛋白及MAPK家族蛋白表达的影响；引入MAPK家族蛋白抑制剂考察生长抑制率和凋亡相关蛋白表达的变化。结果:补骨脂酚可以剂量依赖性地抑制人肝癌HepG2细胞增殖，其生长抑制作用明显强于临床上常用的抗肿瘤药5-氟尿嘧啶，并且补骨脂酚对人正常肝L02细胞具有较低的毒性。进一步研究发现，补骨脂酚可以诱导HepG2细胞发生凋亡。此外，MAPK家族参与到补骨脂酚诱导的HepG2细胞凋亡过程中，补骨脂酚可以剂量依赖性激活JNK的表达发挥促凋亡的作用，同时抑制了ERK促存活通路，然而对p38无明显影响。结论:本研究首次阐明了补骨脂酚诱导人肝癌HepG2细胞生长抑制作用机制，为进一步的临床应用提供了理论依据。     

不同浓度的氟伐他汀对卵巢癌SKOV3细胞中GPX4蛋白表达的影响

目的:探讨不同浓度的氟伐他汀对卵巢癌SKOV3细胞中脂质过氧化物磷脂谷胱甘肽过氧化物酶4（phospholipid glutathione peroxidase 4，GPX4)蛋白表达的影响。方法:采用细胞免疫组化、qRT-PCR和Western Blot技术检测卵巢癌SKOV3细胞中GPX4 mRNA和蛋白的表达。结果:随着氟伐他汀的浓度增加（0 mmol/L、3 mmol/L、10 mmol/L、30 mmol/L），SKOV3细胞数目减少，氟伐他汀呈浓度依赖性抑制SKOV3细胞的增殖；SKOV3细胞中GPX4蛋白和mRNA的相对表达量明显上调。结论:氟伐他汀抑制卵巢癌细胞的增殖转移与其上调卵巢癌细胞中GPX4的表达有关。     

动态对比增强磁共振成像对鼻咽癌临床分期的诊断价值评价

目的:探讨DCE-MRI各项参数对鼻咽癌临床分期的诊断价值。方法:纳入2016年1月至2019年12月确诊的208例NPC初诊患者为研究对象，均行DCE-MRI、DWI检查，分析临床分期不同的患者感兴趣区的转运常数（Ktrans）、血管外细胞外间隙体积百分数（Ve）、速率常数（Kep）、容积分数（fPV）、DWI表观扩散系数（ADC值），考察指标与NPC临床分期的相关性。结果:Ktrans、Ve值随NPC临床分期增加而增大，而ADC值则随之减小，随着T分期增加Ve值增加，Kep、fPV值则在不同分期均未见明显差异（P＞0.05）；相关性结果显示，Ktrans、Ve值与临床分期、T分期呈正相关，而ADC值呈负相关（P均<0.05）；ROC曲线分析结果显示，Ktrans曲线下面积最高，为0.915，而早期（I期、Ⅱ期）、晚期（Ⅲ期与Ⅳ期）的AUC分别为0.906、0.920，均高于DWI ADC（AUC分别为0.824、0.807）。结论:DCE-MRI测量参数可反映不同临床分期NPC的变化，可考虑用于NPC不同分期的诊断、疗效评价。     

基于Oncomine数据库分析SNRPB基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:研究小核糖体核蛋白B（small nuclear ribonucleoprotein polypeptides B and B1，SNRPB)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:运用Oncomine数据库搜索乳腺癌与SNRPB基因相关的数据，通过Kaplan-Meier Plotter数据库分析SNRPB基因与乳腺癌患者预后的关系。结果:Oncomine数据库中SNRPB基因癌组织／正常组织表达量分析结果共有414个，在癌组织中显著高表达109个，低表达3个。其中13个分析结果显示SNRPB在乳腺癌组织(包括6个侵袭性乳腺癌分析结果)中显著高表达，低表达的分析结果为1个。运用Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示，高表达SNRPB的乳腺癌患者其总体生存率（OS）、无复发生存率（PFS）、无远处转移生存率（DMFS）显著低于低表达SNRPB的乳腺癌患者(P＜0.05)。结论:SNRPB基因在乳腺癌中高表达，可以作为有效的生物标志物预测乳腺癌患者转移的发生及判断预后，可为乳腺癌的靶向治疗提供依据。     

斑蝥提取物通过细胞周期G2/M期阻滞诱导人胆管细胞癌QBC939细胞凋亡

目的:研究斑蝥提取物(cantharis extract,CTE)体外诱导人胆管癌QBC939细胞凋亡作用及其对细胞周期分布的影响。方法:体外培养人胆管细胞癌QBC939细胞,CTE作用于QBC939细胞48小时,利用CCK-8法检测QBC939细胞增殖率并计算半数抑制浓度(IC50);光学显微镜下观察细胞形态的改变;AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡情况;用PI染色检测对QBC939细胞周期分布的影响;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白表达变化。结果:CTE显著抑制QBC939细胞增殖,呈浓度及时间依赖性,处理48小时的IC50为4.16μg/ml。经光学显微镜下观察可见随着药物浓度增加,细胞密度减少,游离变圆的细胞明显增多。AnnexinⅤ/PI双染流式凋亡检测示,随着药物浓度的增加,凋亡细胞数量逐渐增加,药物处理组(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5.0μg/ml)的细胞凋亡率分别为(9.52±1.01)%、(15.62±1.88)%、(46.03±4.88)%,与对照组(4.59±0.43)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PI检测细胞周期示,CTE能将QBC939细胞周期阻滞在G2/M期,随药物浓度增加而增加,G2/M期细胞比例逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义,而G1期细胞比例逐渐减少。Western blot检测示,CTE处理组细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)表达降低,相对蛋白表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2家族蛋白Bax和Bid表达增加,而Bcl-2、Mcl-1表达降低,抑制凋亡蛋白家族蛋白Survivin表达显著下降,凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达下降,与对照组比较CTE处理组上述相对蛋白表达量差异有统计学意义(P<0.05);CTE处理组细胞周期相关蛋白Chk1表达无显著改变,相对蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),磷酸化的Chk1蛋白及p53蛋白表达逐渐增加,相对蛋白表达量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CTE显著抑制QBC939细胞增殖,诱导QBC939细胞凋亡,其可能机制与CTE调节凋亡相关蛋白表达,同时调节肿瘤细胞周期相关。     

甘肃地区乳腺癌患者的CYP2D6基因多态性及代谢表型特征分析

目的:分析乳腺癌患者的CYP2D6基因多态性和代谢表型，为乳腺癌患者进行他莫西芬（TAM）个体化临床治疗提供参考依据。方法:选取2018年1月至2019年1月于我院乳腺科确诊的170例乳腺癌患者外周血，通过Sanger测序技术对CYP2D6基因的9个外显子进行全面具体分析。结果:本研究主要发现有5个CYP2D6等位基因变异位点:CYP2D6*10、CYP2D6*4、CYP2D6*7、CYP2D6*41和CYP2D6*5，其对应的发生频率分别为66.5%、5.9%、2.4%、0.6%和0.6%；其中，CYP2D6*10/*10基因型在乳腺癌患者中占据主导地位，发生频率为60.6%。结论:中国甘肃地区乳腺癌患者，多以CYP2D6*10等位基因、CYP2D6*10/*10基因型、TAM中间代谢型为主，这可为乳腺癌患者选择相应的个体化药物治疗方案以及本地区乳腺癌患者今后大规模的药物遗传基因组学研究提供参考数据。     

胶质母细胞瘤差异表达基因的生物信息学分析

目的:应用生物信息学方法挖掘胶质母细胞瘤(GBM)的相关基因，进而探讨发病机制，为GBM临床诊断和靶向治疗提供理论依据。方法:从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库下载基因芯片数据集GSE4290和GSE15824，应用GEO2R筛选GBM的差异表达基因(DEGs)。采用DAVID数据库进行GO富集和KEGG通路富集分析，分别应用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络和关键基因模块，筛选GBM靶基因。进一步运用ONCOMINE数据库验证临床组织样本中靶基因与GBM的关系。结果:共筛选出76个DEGs，富集分析结果显示DEGs在血管生成的正调节、抗原的呈递和处理、信号转导、调节自噬等方面存在显著富集。共挖掘出POSTN、TAGLN、CALD1、EPCAM 4个GBM靶基因，经证实均在临床GBM组织样本中存在显著上调且靶基因的上调与患者的不良预后密切相关。结论:通过生物信息学共挖掘出4个与GBM显著相关的靶基因，可能是未来GBM发病机制、临床诊断、治疗的重要研究靶点。     

儿童慢性 ITP 外周血 CD3 + T 细胞活性氧的检测及临床意义

目的　探讨儿童慢性特发性血小板减少性紫癜 (Idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP) 外周血 CD3+ T 细胞中活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 含量及其与血小板的关系，为临床诊断和治疗提供依据。方法　随机收集 30 例慢性 ITP患儿外周血为试验组，30 例健康儿童外周血为对照组，用流式细胞术检测外周血 CD3 + T 细胞和 ROS 平均荧光强度，进行统计学分析。结果　试验组CD3 + T细胞ROS平均荧光强度（15.98±5.78）明显高于对照组ROS平均荧光强度（4.65±1.03），两组间 ROS 的差异有统计学意义（t=2.956，P ＜ 0.05）；试验组 CD3 + T 细胞 ROS 与血小板成负性相关关系。结论　慢性ITP 患儿外周血 CD3 + T 细胞的 ROS 明显高于对照组，说明 ROS 可以为儿童慢性 ITP 的诊断及治疗提供一定的参考依据。